Y管嗅觉仪 蜜蜂行为测定 标准化操作流程

一、基础参数

1. 环境：温度25±1℃、湿度60%～70%、匀光无直射、无震动噪音

2. 气流：单臂流量120 mL/min，两路气流均衡

3. Y管规格：夹角75°左右，臂长/基管常规15cm，内径1.5cm-3cm左右

4. 平衡时间：气路预通10min

5. 单头测试时长上限：5min

6. 单组样本量：每组20～30头，单蜂单次使用，不重复

二、器材与耗材

Y型嗅觉仪、气泵、双路流量计、活性炭过滤瓶、加湿瓶、特氟龙通气软管、气味样品瓶、空白对照瓶、定性滤纸、移液枪、无水乙醇、冰浴盒、离心小管、蔗糖水

三、前期准备

1.仪器清洗除味

全部玻璃器皿乙醇擦拭→清水冲洗→烘干；管路优先特氟龙材质，全程避免杂味残留。

2.试虫预处理

1. 选用健康外勤采集蜂；

2. 20%蔗糖水饲喂饱食，饥饿静置2～3h；

3. 冰浴轻度麻醉1～2min，单管分装备用。

3.气味配制

- 处理组：定量待测气味试剂滴于标准滤纸片，放入味源瓶密封

- 空白对照：等量纯溶剂（正己烷/液体石蜡）滤纸，同步放置

四、实操步骤（按顺序操作）

1. 组装气路：气泵→分流流量计→左右活性炭过滤→加湿瓶→两个样品瓶→分别接入Y管两臂

2. 开启气泵，调节两路流量至统一120-300mL/min左右，通气10min排空管路残留气味

3. 单头蜜蜂从Y管基部入口放入，管口轻塞棉球防逃逸

4. 观察蜂爬行选择，严格按判定标准记录

5. 每测试10头蜜蜂，左右互换味源管路，消除位置误差

6. 每组测试结束，更换滤纸、清洁味源瓶，再开展下一组试验

五、结果判定标准

1. 有效选择：进入单侧臂≥5cm + 停留时长≥5s，记为对应气味选择

2. 无反应：5分钟内停留基部、不移动、不做选择，记为无效个体，剔除统计

3. 忌避/偏好：对比处理组vs对照组选择数量，做差异分析

六、数据记录&统计

1. 记录项目：编号、测试时间、处理气味、对照、选择气味臂、无反应个体数

2. 核心计算：

选择率=有效选择目标气味蜂数 ÷ 总有效测试蜂数

3. 差异检验：卡方检验，P＜0.05 判定差异显著

简易数据记录模板

组别：________  温度：℃  湿度：%  流量：120-300mL/min左右

七、关键避坑要点

1. 两路气流必须完全一致，气流差会直接干扰昆虫选择

2. 试验全程隔绝视觉干扰，禁止强光、阴影差

3. 操作人员少用香水、护手霜，杜绝外源气味污染

4. 所有耗材分开专用，处理组、对照瓶不混用